色譜儀的衍生化主要是為了提高目的物的可檢測性。對于氣相色譜,主要是為了增強目的物的揮發性或改善目的物的極性。對于液相色譜儀,主要是為了提高檢測器對目的物的響應。
一、衍生化分類:
1、柱前衍生:在分析物經過色譜柱前與衍生劑反應,反應產物在色譜柱上實現分離,實際分離的是衍生產物,檢測的也是衍生產物。
2、柱后衍生:分析物在色譜柱中實現分離后,在衍生池內與衍生劑反應,檢測的是衍生產物。
二、適用的化合物:
生物酸、生物堿、胺類、抗生素和氨基酸類等。
三、衍生化要求:
1、衍生劑必須過量且穩定。衍生劑不過量,反應不*,檢測不充分。衍生劑不穩定,重現性差。
2、衍生劑、衍生產物和衍生副產物容易分離。只能檢測到衍生產物。
3、衍生反應快速、*。
四、柱前衍生特點:
1、優點:
?。?)相對自由地選擇反應條件。
?。?)不存在反應動力學的限制。
?。?)衍生副產物可進行預處理,以降低或消除其干擾。
?。?)容易允許多步反應的進行。
?。?)有較多的衍生劑可選擇。
?。?)不需要復雜的儀器設備。
2、缺點:
?。?)形成的衍生副產物可能對色譜分離造成較大困難。
?。?)在衍生化過程中,容易引入雜質,或損失樣品。
五、柱后衍生特點:
1、優點:
?。?)重現性好,影響因素少,引入物質比較少。
?。?)分析物可以在其原有的形式下進行分離,容易選用已有的分析方法。
2、缺點:
?。?)對于一定的溶劑和有限的反應時間來說,目前只有有限的反應可供選擇。
?。?)可能有擴散問題。
?。?)需要額外的儀器設備。