分析型液相色譜(HPLC)是一種與氣液色譜相對應的液相色譜技術,用于分離、鑒定、定量和純化復雜化合物。它主要通過不同樣品分子與固定相之間作用力的差異來實現分離。
分析型液相色譜的基本原理是利用柱子內填充物(固定相)和溶劑(流動相),讓樣品在固定相中進行吸附、分配和離子交換等反應,實現各個組分的分離和純化。樣品分離的速度和效率取決于填料的物理化學性質,樣品的化學結構,流動相的成分和流速等因素。隨著科技進步,現代的HPLC具有分辨率高、分離能力強、自動化程度高、耗時短等特點。
分析型液相色譜在化學、生物醫藥、食品、醫學等領域得到了廣泛應用。在藥物領域,HPLC可用于提取中藥,分離純化化合物等。在環境領域,HPLC可用于分析食品、水源和大氣污染物等。在化學分析領域,HPLC可用于毒理學、分析化學和制藥學等。
根據分析型液相色譜的應用對象、分離效率和速度,可以選擇不同種類的柱子、填料和流量。不同柱子的選擇應該是根據樣品的性質、背景干擾程度、分離反應的性質等綜合考慮。對于極性較小的樣品,常用C18柱;對于極性較大的化合物,常用C8柱。填料可以有多種選擇,如化學變性聚合物、硅膠、甲基硅膠、碳鏈等。流量通常與柱子大小和填料性質有關。通常情況下,流量越大,分離效率越低;流量越小,分離效率越高,速度越慢。
在選取分析型液相色譜參數時要考慮幾個方面,如樣品的純度和濃度、溶劑成分、最大峰的數量、流量和波長選擇等。在決定它何時應用于分析樣品類型時,人們也要考慮所需分離的組分類別、需要識別的特定組分類別等因素。