1、制備型加壓液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,分為:
?。?)低壓液相色譜;
?。?)中壓液相色譜;
?。?)高壓液相色譜;
2、低壓色譜(LPLC)
柱壓一般低于5bar(或75psi)。
低壓色譜一般是由蠕動泵、進樣閥和檢測器組成,可以連續化,實現自動的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的,長度一般為240-440mm,內徑為10-40mm。
對于大多數在紫外區有吸收的物質,光學檢測器很常用。填料一般使用軟質的葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、合成高聚物或離子交換劑,粒徑一般為40-60μm。
3、中壓液相色譜(MPLC)
柱壓在5-20bar(或75-300psi)之間,廣泛用于實驗室和工業規模的生物制品(如動物臟器提取液、濃縮液、體液、植物提取液、生物技術發酵液等。往往需要經過濾膜作初級凈化的處理,以提取或純化所需的產品。
4、高壓液相色譜(HPLC)
這是指柱壓一般大于20bar(或300psi)的“高壓(或高效)液相色譜”,通常指所用色譜柱的塔板數大于2000,一般是在2000~20000的范圍之間。
當需要從大量的物質中分離純化不足1%的所需成分時,分離工作將會十分困難,往往在純化的最后階段需要使用10μm或更小顆粒的高效填料。為獲得所需微量組分,可采用如下分離手段:制備型分離→半制備型分離→分析型分離→產物。為提高每次分離獲得純品的數量,制備型高壓液相色譜分離通常在超載情況下運行。